豬乙型腦炎活疫苗(億力能)免疫效果試驗(yàn)
發(fā)布時(shí)間:
2016-02-26 00:00
作者:
王和平
乙型腦炎是由流行性乙型腦炎病毒所引起的一種人畜共患傳染病。豬乙型腦炎主要表現(xiàn)為懷孕母豬流產(chǎn)、死胎、產(chǎn)弱仔,公豬睪丸炎等癥狀。常常給養(yǎng)殖場(chǎng)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。豬多呈隱性感染,流行有明顯的季節(jié)性,豬感染后的病毒血癥常常成為人類(lèi)乙腦流行的傳染源。因此,控制豬乙腦流行具有重大意義。中岸生物(原湖南亞華生物藥廠)與人用乙型腦炎活疫苗發(fā)明者中國(guó)工程院院士俞永新博士(中國(guó)生物制品鑒定所工作)合作,在張道華研究員的主持下,歷時(shí)十年,研究成功了豬乙型腦炎弱毒活疫苗 ,于2005年,獲得了豬乙型腦炎活疫苗一類(lèi)新獸藥證書(shū),證書(shū)號(hào):(2005)新獸藥證字32號(hào),同年獲得了第一個(gè)豬乙型腦炎活疫苗正式生產(chǎn)批文,從此為中國(guó)豬乙型腦炎的防控做出了巨大的貢獻(xiàn)。產(chǎn)品上市以來(lái)產(chǎn)量逐年增加,目前該疫苗市場(chǎng)每年供應(yīng)量達(dá)3000萬(wàn)頭份以上,市場(chǎng)使用率超過(guò)60%。
為了全面了解疫苗免疫效果,中岸生物在全國(guó)開(kāi)展了豬乙型腦炎活疫苗(億力能)免疫效果跟蹤試驗(yàn)。在湖南、湖北、廣東、江西、福建、河南、浙江等省市部分豬場(chǎng)共計(jì)約50萬(wàn)余頭種公母豬進(jìn)行跟蹤試驗(yàn)。經(jīng)臨床觀察、產(chǎn)仔成績(jī)抽樣調(diào)查,結(jié)合抗體檢測(cè)、精液檢測(cè)、病理剖檢以及病毒分離等,試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明:豬乙型腦炎活疫苗(億力能)安全有效,具有免疫效果好,保護(hù)率高的特點(diǎn),是規(guī)模化豬場(chǎng)首選疫苗。一材 料
疫苗:億力能 ,豬乙型腦炎活疫苗(SA14-14-2株),湖南中岸生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。
抗體檢測(cè)試劑盒:豬乙型腦炎酶聯(lián)免疫(ELISA)診斷試劑盒:深圳市綠詩(shī)源生物技術(shù)有限公司生產(chǎn),主要檢測(cè)豬血清中乙型腦炎病毒IgG抗體。
抽樣豬群:湖南、湖北、廣東、江西、福建、河南、浙江等省的大中小型豬場(chǎng),共計(jì)39400頭后備母豬,3500頭后備種公豬。
二方 法
臨床觀察:觀察和記錄豬乙型腦炎活疫苗免疫豬群飲水、采食、精神狀況及體溫變化。免疫種公豬特別注意陰囊外觀、睪丸發(fā)育狀況。免疫母豬注意配種后的妊娠、分娩情況。
抗體檢測(cè):采取部分免疫豬群免疫前和免疫21日后血樣,運(yùn)用ELISA診斷試劑盒檢測(cè)乙腦抗體水平。參照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。產(chǎn)仔成績(jī):將同群6~7月齡后備母豬隨機(jī)分組,免疫組分別于配種前30日和配種前7日每頭肌注豬乙腦活疫苗1ml(1頭份),提供精液的公豬須經(jīng)乙腦抗體檢測(cè)呈陰性,同時(shí)設(shè)立對(duì)照組。調(diào)查統(tǒng)計(jì)妊娠母豬產(chǎn)活仔總數(shù),計(jì)算平均窩產(chǎn)活仔數(shù)及平均活仔率。將免疫組與對(duì)照組及往年非免疫初產(chǎn)豬群產(chǎn)仔成績(jī)相比較。免疫組、對(duì)照組均同條件下管理飼養(yǎng),其它疫苗按該場(chǎng)免疫程序接種。胎兒剖檢及病毒分離:將試驗(yàn)豬場(chǎng)試驗(yàn)豬群所產(chǎn)死胎以及出生3日內(nèi)可疑死亡、弱仔抽樣剖檢,取胎兒腦組織制成懸液接種BHK21細(xì)胞進(jìn)行病毒分離確診。炎癥睪丸剖檢及精液檢測(cè) :將同群6~7月齡試驗(yàn)后備公豬隨機(jī)分組,免疫組肌注1ml(1頭劑)豬乙型腦炎活疫苗,間隔3周后加強(qiáng)免疫1次(1ml)。免疫組、對(duì)照組公豬觀察睪丸發(fā)育情況,采集精液測(cè)定精液品質(zhì)。對(duì)發(fā)育異常睪丸剖檢,取睪丸樣、精液樣進(jìn)行病毒分離確診。
三試驗(yàn)結(jié)果免疫臨床觀察:所有免疫豬群體溫正常,飲食正常,精神狀況良好,無(wú)一例后備公豬因接種豬乙型腦炎活疫苗引發(fā)睪丸紅腫、發(fā)熱現(xiàn)象,也無(wú)一例免疫母豬因接種豬乙型腦炎活疫苗出現(xiàn)流產(chǎn)現(xiàn)象??贵w檢測(cè) :從實(shí)驗(yàn)豬場(chǎng)共抽取39400份后備母豬和3500份后備公豬血清,運(yùn)用ELISA診斷試劑盒檢測(cè)乙腦抗體水平。免疫前血清陽(yáng)性有600份,免疫21日后血清陽(yáng)性有42600份,轉(zhuǎn)陽(yáng)率達(dá)98%,具體見(jiàn)表1:
產(chǎn)仔成績(jī):從試驗(yàn)豬場(chǎng)抽樣統(tǒng)計(jì)1576頭免疫初產(chǎn)母豬產(chǎn)仔情況:免疫組窩平均活仔為10.42頭,平均活仔率為95.5%,對(duì)照組窩平活仔為7.68頭,平均活仔率為70.5%,兩組比較:免疫組比對(duì)照組窩平多產(chǎn)活仔2.74頭,活仔率提高25%,經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析,差異極顯著(P<0.01)(詳見(jiàn)表2)。同時(shí),將免疫組與該場(chǎng)往年非免疫初產(chǎn)豬群相比每窩多產(chǎn)活仔數(shù)1~2頭,平均活仔率提高8~15%,產(chǎn)仔成績(jī)顯著提高。
胎兒剖檢及病毒分離 :對(duì)初產(chǎn)試驗(yàn)豬群所產(chǎn)死胎、流產(chǎn)胎(每窩取1例)及出生3日內(nèi)可疑死亡弱仔(如有神經(jīng)癥狀)抽樣剖檢。免疫組取樣17例,剖檢發(fā)現(xiàn)胎兒病例臟器病變各不相同,腦內(nèi)水腫出血現(xiàn)象少,有些出現(xiàn)黃疸現(xiàn)象,取胎兒腦組織制成10%懸液,接種BHK21細(xì)胞,未分離到乙腦病毒。對(duì)照組抽取29例剖檢(流產(chǎn)胎每窩取1例),發(fā)現(xiàn)胎兒病例臟器病變大致相同,主要表現(xiàn)血液稀薄,腹水多,腦內(nèi)出血水腫,取胎兒腦組織制成懸液接種BHK21細(xì)胞分離病毒,有27例分離到乙腦病毒,詳情見(jiàn)表3:
炎癥睪丸剖檢及精液檢測(cè) :免疫組52頭后備公豬有2例出現(xiàn)睪丸炎,其中1例經(jīng)抗菌藥物治療后康復(fù),2例均淘汰后,取睪丸制成懸液,接種BHK21細(xì)胞未分離到乙腦病毒;而對(duì)照組13頭后備公豬有3例出現(xiàn)睪丸炎。3例淘汰后摘取睪丸制成懸液,接種BHK21細(xì)胞培養(yǎng),有2例分離到乙腦病毒(詳見(jiàn)表4)。免疫組和對(duì)照組實(shí)驗(yàn)公豬在初配前采集精液,進(jìn)行精子密度、精子活率項(xiàng)目的品質(zhì)評(píng)定,對(duì)異常精液進(jìn)行乙腦病毒分離,結(jié)果免疫組未分離到乙腦病毒,對(duì)照組又有1例分離到乙腦病毒(詳見(jiàn)表4、表5)。
注:精子密度:用血球計(jì)數(shù)計(jì)算精子數(shù),大于2億/ml為密,1~2億/ml為中,小于1億/ml為稀。
精子活率:用前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子數(shù)占精子總數(shù)的百分率表示,超過(guò)60%為正常,反之為異常。
四討論與結(jié)論根據(jù)對(duì)本次實(shí)驗(yàn)豬場(chǎng)39400頭免疫后備母豬和3500頭免疫后備公豬的臨床觀察及其它用苗單位信息反饋,無(wú)一例因免疫接種所致異常反應(yīng)。免疫豬群亦無(wú)一例因感染乙腦病毒引起流產(chǎn)和睪丸炎。結(jié)果表明:中岸生物生產(chǎn)的豬乙型腦炎活疫苗(SA14-14-2株)(億力能)接種豬群后不會(huì)誘發(fā)懷孕母豬流產(chǎn)、死胎及公豬睪丸炎,對(duì)免疫豬群具有可靠的安全性。乙腦強(qiáng)毒感染懷孕母豬能夠侵襲胎盤(pán)感染子宮內(nèi)胎兒,引起母豬流產(chǎn)、死胎;感染種公豬引起公豬睪丸炎;本次試驗(yàn)免疫后備母豬和后備種公豬被乙型腦炎強(qiáng)毒感染病例明顯低于非免疫對(duì)照。結(jié)果表明:繁殖豬群接種豬乙型腦炎活疫苗(億力能)能夠有效地產(chǎn)生免疫力,抵御乙腦強(qiáng)毒感染,降低妊娠豬流產(chǎn)、死胎及預(yù)防公豬睪丸炎,具有較好的免疫效果。
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